小鼠ELISA试剂盒原理及注意事项

       此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 小鼠ELISA试剂盒可用于测定抗原，也可用于测定抗体。
 

小鼠ELISA试剂盒选购后需注意哪些：
1.检查检查说明书、包装盒的质量，通常伪劣产品为了降低成本，印刷的质量会比较差。其次仔细阅读说明书，如上所示查找小鼠ELISA试剂盒的性能指标。利用干扰实验即可鉴别ELISA试剂盒是否检测目的抗原a. 将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液；b. 37℃孵育15分钟后，代替原试剂盒中的检测抗体；c. 后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物；d. 实验完毕后，检测其标准曲线，如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配，试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原，该小鼠ELISA试剂盒为假货ELISA试剂盒；e. 如果标准曲线无线性，则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰，影响了其实际试剂盒抗体的检测作用，则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。

一、加样的经验总结
加样或加试剂时，请注意在吸取标本/标准品，酶结合物或底物时，个孔与一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间控制 在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。 

二、孵育的三条必知
1.为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标 板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发。
2.洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态。
3.同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

三、反应时间的控制
加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如，每隔 10分钟），如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 

四、小鼠ELISA试剂盒洗涤小技巧
洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直 接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响*后的酶标仪读数。 

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